Иммунограмма: показания, сущность метода, нормальные и патологические значения

Функцией иммунитета является защита организма от всех факторов, способных причинить вред организму, поэтому определение его статуса с использованием метода иммунограммы не теряет своей актуальности. Иммунограмма представляет собой диагностический метод, позволяющий получить представление о состоянии иммунитета человека и способности организма защищаться от воздействия бактериальных и вирусных инфекций. В совокупности с анализом клинической картины и результатов, полученных в ходе других исследований, применяется для диагностики различных заболеваний и патологических состояний. При оценке иммунного статуса учитывается количество обеспечивающих защиту организма элементов, их соотношение и активность.

Иммунограмма

Иммунологическое исследование показывает текущее состояние иммунитета и проводится для оценки эффективности защитных механизмов. Анализ индивидуальных параметров клеток, их количественных характеристик и функциональной активности позволяет выявить дефекты иммунитета, диагностировать различные заболевания, недостаточность механизмов защиты и аллергические реакции организма. Тесная связь иммунной системы с нейроэндокринной, чувствительность к стрессовым воздействиям, сезонным и суточным колебаниям обусловливает необходимость интерпретации полученных данных в контексте клинических проявлений и результатов дополнительных методов исследований.

Определенные отклонения в иммунограмме, выступающие показателями патологии в одном случае, могут являться вариантами нормы в другом, когда отсутствие некоторых компонентов иммунной защиты компенсируется количественными и качественными изменениями остальных структур. Анализ состояния иммунитета приобретает большую достоверность при оценке его в динамике.

Показания

Проведение иммунологического исследования оправдано только при наличии строгих показаний. Необходимость оценки иммунного статуса может быть продиктована следующими причинами:

• наличием первичных и вторичных иммунодефицитных состояний (врожденных или приобретенных);
• часто повторяющимися инфекционными заболеваниями;
• хроническими инфекциями, устойчивыми к терапии;
• аутоиммунными заболеваниями (аутоиммуный тиреоидит, инсулинзависимый сахарный диабет и другие);
• аллергическими заболеваниями;
• онкологическими заболеваниями;
• химиотерапией;
• лимфопролиферативными заболеваниями;
• планирующимися сложными оперативными вмешательствами;
• развитием послеоперационных осложнений;
• трансплантацией органов;
• необходимостью осуществления динамического контроля за приемом иммуномодуляторов;
• решением вопроса о возможности проведения прививок детям с признаками иммунодефицита;
• анорексией;
• развитием серьезных осложнений в ответ на проводимую терапию.

В ряде случаев иммунологическое исследование назначается при беременности, когда имеются данные о наличии у матери некоторых вирусных и аутоиммунных заболеваний, СПИДа, а также если предполагается развитие резус-конфликта.

Противопоказаниями для выполнения иммунограммы выступают инфекционные заболевания в стадии обострения, протекающие с высокой температурой, менструальные кровотечения у женщин.

При выявлении отклонений от нормы и возникновении необходимости в повторном анализе он должен проводиться в той же лаборатории, что и предыдущий.

Подготовка к анализу

Исследование проводится утром натощак. Накануне исключается прием алкоголя, медикаментов, употребление продуктов-аллергенов, смена часовых поясов, значительные физические и психические нагрузки.

При приеме жизненно важных лекарственных препаратов нужно сообщить об этом врачу.

Кровь для исследования отбирается из вены в две (иногда больше) пробирки, одна из которых содержит антикоагулянт. В некоторых случаях для проведения исследования подходит капиллярная кровь (из пальца).

План лабораторного исследования

Человеческий иммунитет представлен двумя типами: врожденным и приобретенным, причем последний имеет клеточное и гуморальное звено. Врожденные иммунные механизмы активируются тотчас после контакта с инфекционным агентом, после чего включаются приобретенные механизмы. Гуморальный и клеточный ответ реализуют Т- и В-лимфоциты, антитела и цитокины.

В соответствии с этим иммунологическая диагностика проводится по следующему плану:

• оценка Т-звена: количество Т-лимфоцитов, их подвидов;
• оценка В-звена: количество В-лимфоцитов, уровень иммуноглобулинов;
• фагоцитарное звено: количество нейтрофилов и моноцитов, активность фагоцитоза;
• система комплемента: общий комплемент, С3 и С4.

Грубые нарушения в работе защитной системы выявляются при проведении тестов I уровня. Тестирование включает:

• подсчет общего и относительного числа лимфоцитов;
• подсчет числа Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов;
• анализ фагоцитарной активности нейтрофилов;
• определение иммуноглобулинов (Ig A, Ig G, Ig M);
• титр комплемента.

Если возникает необходимость в углубленном исследовании, проводится тестирование II уровня, включающее:

• определение подвидов Т- и В-лимфоцитов;
• выявление комплексов «антиген-антитело-белки комплемента» (ЦИК);
• пролиферативный ответ лимфоцитов на митогены или антигены;
• определение содержания цитокинов;
• идентификацию индекса Т-хелпер/Т-супрессор;
• оценку активности киллерных лимфоцитов;
• реакцию бласттрансформации лимфоцитов;
• НСТ-тест;
• оценку продукции антител различной специфичности и др.

Интерпретация

Расшифровка иммунограммы производится в соответствии с определенным планом. В первую очередь оценивается количество кровяных клеток и подсчитывается число лейкоцитов, причем значение имеет не только относительное, но и абсолютное их значение. Это необходимо для определения звена иммунитета, в котором произошел сбой.

Лейкоциты в норме:

Показатель	Концентрация у мужчин	Концентрация у женщин
Лейкоциты	4,2-9,1 х 109 /л	3,9-10,3х109 /л
Нейтрофильные лейкоциты: палочкоядерные, сегментоядерные	1-7% (0,04-0,4 х 109 /л ), 45-71% (1,9-5,6 х 109 /л)	1 -7% (0,04-0,4 х 109 /л ), 45-71% (1,9-5,6 х 109 /л)
Лимфоциты	18-38% (1,3-3,4 х 109 /л )	18-38% (1,3-3,4 х 109 /л )

Неспецифический иммунитет

Система врожденного иммунитета представлена макрофагами, эозинофилами, дендритными клетками, полиморфно-нуклеарными клетками (лейкоцитами), IFN-продуцирующими клетками, а также белками острой фазы, ферментами, интерферонами и хемокинами. Она не обладает иммунной памятью и специфичностью.

Ее характеризуют следующие показатели:

• количество моноцитов и нейтрофилов;
• показатели фагоцитоза;
• количество естественных киллеров;
• титр комплемента;
• концентрация лизоцима в секреторных жидкостях.

Фагоциты

К ним относятся нейтрофилы и макрофаги. Фагоциты предоставляют антигены Т- и В-лимфоцитам, выполняя основные функции неспецифической защиты.

Дефекты фагоцитоза проявляются тяжелыми бактериальными и грибковыми инфекциями дыхательной системы, ротовой полости, кожи. Они могут приводить к задержке физического и умственного развития. Количество нейтрофилов при этом может быть нормальным, сниженным или повышенным.

Для оценки поглотительной способности фагоцитов исследуют фагоцитарную активность клеток, которая определяется:

• количеством активных фагоцитов (числом фагоцитирующих клеток в 1 литре крови);
• фагоцитарным числом (средним количеством микроорганизмов либо латексных частиц, которое поглощает одна клетка);
• фагоцитарной емкостью крови (количеством микроорганизмов либо латексных частиц, поглощенных клетками, содержащимися в 1 литре крови);
• фагоцитарным показателем (процентом клеток-участников фагоцитоза);
• индексом завершенности фагоцитоза.

В норме фагоцитарное число составляет 5-9 микроорганизмов; процент фагоцитоза — 65-95%; в течение 2 часов фагоцитами разрушается 95% бактерий.

Повышение показателей фагоцитарной активности характерно для воспаления бактериальной природы, лейкоцитоза, аллергических реакций, аутоиммунных заболеваний и реакции на трансплантат.

Снижение показателей наблюдается в следующих случаях:

• наличие у пациентов хронических воспалительных заболеваний (бактериальных и вирусных);
• врожденные дефекты системы фагоцитоза;
• синдром Чедиака – Хигаси;
• некоторые хромосомные болезни;
• аутоиммунные заболевания;
• болезни иммунных комплексов;
• дефицит иммуноглобулинов, комплемента;
• проведение химиотерапии;
• после курса радиолечения или воздействия ионизирующего излучения;
• вторичные и первичные иммунодефициты;
• новообразования;
• тяжелые стрессы;
• синдромы потери белка.

Система комплемента

Представлена белковыми молекулами, которые вырабатываются макрофагами и клетками печени. В норме они неактивны. Активация комплемента приводит к разрушению клеточных стенок за счет запускаемых реакций.

Дефекты комплемента приводят к развитию системных аутоиммунных заболеваний или тяжелых рецидивирующих бактериальных инфекций.

Активность комплемента повышается при аутоиммунных патологиях и аллергических реакциях. При анафилактическом шоке он отсутствует.

В норме:

• титр комплементой активности у взрослых составляет 60-140 ЕД/мл;
• содержание С3 в крови — 0,54-1,21 г/л;
• содержание С4 в крови — 0,22-0,55 г/л.

Система приобретенного иммунитета представлена клеточными и гуморальными компонентами. Клеточные компоненты включают в себя лимфоциты и их подвиды, макрофаги и дендритные клетки. Гуморальными компонентами являются антитела и интерлейкины. Приобретенный иммунитет обладает свойством «памяти» и специфичностью.

Клеточное звено иммунитета

Состояние клеточно-опосредованного иммунитета определяется концентрацией Т-лимфоцитов и их подвидов, пролиферативной активностью и кожными реакциями гиперчувствительности отсроченного типа. Т-лимфоциты отличает наличие особого рецептора — кластера дифференцировки CD2. В соответствии с этим зрелые лимфоциты обозначаются как CD3 (CD3+CD19-CD45+), Т-хелперы — CD3+CD4+CD8-CD45 +, Т-цитотоксики — CD8, нормальные киллеры — CD16.

В нормальной иммунограмме содержание Т-лимфоцитов следующее:

Т-лимфоциты и их подвиды	Концентрация % /(*10 9/л)
Все Т-лимфоциты, из которых	60-83/0,96-2,05
CD3+αβTcR+γδTcR-CD45 +	59,8-79,2/0,922-1,959
CD3+γδTcR+αβTcR-CD45 +	1,4-6,3 /0,036-0,041
CD3+CD4+CD8-CD45 + (Т-хелперы)	34-57/0,58-1,12
CD4+CD45RA-CD45R0 + (Т-хелперы памяти)	6-26/0,070-0,703
CD4+CD45RA+CD45R0 + (Т-хелперы недифференцированные)	22-42/0,282-1,143
CD3+CD8+CD4-CD45 + (Т-цитотоксики)	17-34/0,37-0,96
CD3+CD56+CD16+CD45 + (T-NK-лимфоциты)	0,51-6,2/0,008-0,167
CD4+HLA-DR+CD25+CD45 + (Т-лимфоциты с рецептором к интерлейкину-2)	0,51-6,2/0,008-0,167
CD4+CD25brightCD127negCD45 + (Т-регуляторы)	0,7-1,4/0,01-0,019
Соотношение Т-хелперы/Т -цитотоксики	1,6-2,1

Клеточный иммунитет обеспечивает организм способностью противостоять вирусным и грибковым агентам, канцерогенам, тканевым гельминтам и условно-патогенным возбудителям, реализует поздние аллергические реакции. Уменьшение концентрации зрелых Т-лимфоцитов обусловлено различными иммунодефицитными состояниями, возникающими по следующим причинам:

• хронические инфекции;
• тяжелые оперативные вмешательства;
• воздействия токсинов;
• ожоговая болезнь;
• прием химиопрепаратов и глюкокортикостероидов.

Рост абсолютного числа Т-лимфоцитов может свидетельствовать о гиперактивности иммунной системы, возникающей при лимфолейкозах (острых и хронических). При стимуляции иммунитета антигенами происходит повышение абсолютного количества Т-хелперов, что сопровождается ростом числа клеток — участников иммунного процесса. При гипореактивном синдроме, характерном для некоторых иммунодефицитов, наблюдается уменьшение количества Т-хелперов в крови.

Уменьшение количества Т -супрессоров свидетельствует о нарушении клеточно-эффекторного реагирования при хронических вирусных инфекциях, злокачественных новообразованиях, приеме химиопрепаратов.

Натуральные киллеры (CD3-CD16+CD56+CD45 +) осуществляют неспецифическое распознавание антигена, обеспечивая защиту от опухолевых агентов и вирусных частиц.

На иммунограмме:

• Естественные киллеры — 9-19%/0,13-0,39*109/л;
• Цитолитические лимфоциты — 8,6-17,8%/0,124-0,364*109/л;
• Цитокинпродуцирующие лимфоциты — 0,4-1,2%/0,006-0,026*109/л.

Состояние гуморального иммунитета

Оценивается по количеству В-лимфоцитов (CD19, CD20, CD22) и иммуноглобулинов.

В-лимфоциты (CD3-CD19+HLA-DR-CD45 +) представляют собой лимфоциты, способные продуцировать антитела.

В нормальной иммунограмме содержание В-лимфоцитов следующее:

В-лимфоциты и их подвиды	Концентрация % /(*10 9/л)
В-лимфоциты	8-18/0,20-0,39
CD19+CD5-CD27+CD45 + (В-лимфоциты памяти)	1,9-6,9 /0,013-0,042
CD19+CD5+CD27-CD45 + (В1-лимфоциты)	0,6-2,2 /0,023-0,116
CD19+CD5-CD27-CD45 + (В2-лимфоциты)	6,4-15,0/0,085-0,325

Повышение концентрации В-лимфоцитов наблюдается при:

• острых инфекциях различной этиологии;
• СПИДе (в начальном периоде);
• хронических болезнях печени (гепатит вирусной этиологии, цирроз);
• аутоиммунных болезнях (инсулинзависимый сахарный диабет, аутоиммунный тиреоидит, системные болезни соединительных тканей);
• болезни Бенье-Бека-Шауманна;
• муковисцидозе;
• заболеваниях кишечника;
• моноклональной гаммапатии;
• инфекционном мононуклеозе;
• хроническом лимфолейкозе;
• при повторном инфицировании в остром периоде.

Снижение числа всех В-лимфоцитов возможно при физиологическом недостатке гаммаглобулинов у детей (до 3–5 месяцев), врожденной агаммаглобулинемии, лечении иммунодепрессантами, спленэктомии, недостаточности растворимых компонентов иммунной защиты.

Пролиферативная активность лимфоцитов оценивается по реакции бласттрансформации лимфоцитов. Спонтанная бласттрансформация повышена при бактериальных и вирусных инфекциях, аутоиммунных и аллергических заболеваниях, у новорожденных.

Иммуноглобулины — это пептидные молекулы плазмы крови, образующиеся под влиянием антигенов. Основные классы иммуноглобулинов представлены IgA, IgG, IgM и IgE.

Иммуноглобулины А

Синтезируются плазмоцитами слизистых оболочек в ответ на воздействие чужеродных агентов. Преимущественно содержатся на поверхности слизистых оболочек, в секретах желез дыхательного, пищеварительного тракта, мочеполовой системы, а также в молоке и молозиве. Иммуноглобулины препятствуют прикреплению вредоносных агентов к поверхности клеток, обеспечивая им защиту. Через плаценту не проникают, поэтому у новорожденных содержатся в минимальных количествах. Поступают в организм при грудном вскармливании от матери, достигая характерных для взрослых значений к пятилетнему возрасту ребенка. Составляют 10-15% от всех иммуноглобулинов крови.

Нормы Ig A:

Возраст	Содержание в г/л
До 3 месяцев	отсутствует
от 3 до 12 месяцев	0,02-0,7
от 12 месяцев до 5 лет	0,09-1,0
от 5 до 12 лет	0,52-2,03
от 12 до 16 лет	0,58 -2,49
от 16 до 20 лет	0,63-3,49
от 20 лет	1,0-4,52

Заболевания, связанные с изменением нормального уровня IgA

Повышение IgA:

• анафилактоидная пурпура;
• цирроз печени;
• IgA-миелома;
• аутоиммуные болезни;
• болезнь Бенье-Бека-Шауманна;
• поражения кожи, ЖКТ, дыхательной системы и урогенитального тракта различной природы;
• болезнь Шенлейн-Геноха;
• средиземноморская лимфома тонкой кишки;
• муковисцидоз;
• гаммапатия моноклональная;
• макроглобулинемия Вальденстрема.

Снижение уровня IgA:

• острая лимфоцитарная лимфома;
• агаммаглобулинемия;
• атаксия-телеангиэктазия;
• хронический лимфолейкоз;
• хронический миелолейкоз;
• дисгаммаглобулинемия III типа;
• цирроз печени;
• наследственная телеангиэктазия;
• IgG-миелома;
• лимфоидная аплазия;
• макроглобулинемия;
• нефротический синдром;
• болезнь Стилла;
• воспаление толстого кишечника;
• лямблиоз;
• хронические грибковые поражения кожи и слизистых оболочек;
• общий иммунодефицит;
• гипоплазия тимуса;
• синдром Луи-Бара;
• атопический дерматит.

На результаты анализа могут повлиять: беременность, физическая нагрузка, лучевая терапия, состояния, приводящие к потере белка (болезни почек, кишечника), прием антидепрессантов, нейролептиков, химиопрепаратов, препаратов золота, эстрогенов и оральных контрацептивов, а также недавняя иммунизация.

Иммуноглобулины М

Синтезируются после воздействия инфекционного агента и свидетельствуют об острой фазе воспаления. Иммуноглобулины этого класса участвуют в активации комплемента, усилении фагоцитоза. Они «склеивают» бактерии и нейтрализуют вирусы. Иммуноглобулины М участвуют в защите плода от инфекций, поскольку появляются в процессе внутриутробного развития, но размер молекул не позволяет им преодолевать плацентарный барьер. Фракция Ig М составляет 5-10% от всех иммуноглобулинов крови.

Нормы IgM:

Возраст	Пол	Содержание, г/л
до 3 мес.	м/ж	0,05-0,2
от 3 до 12 мес.	м	0,18-1,44
	ж	0,18-1,51
от года до 12 лет	м	0,5-1,84
	ж	0,48-2,24
от 12 лет и взрослые	м	0,21-2,5
	ж	0,34-2,94

Заболевания, связанные с изменением уровня IgM в сыворотке крови

Повышение уровня IgM:

• дисгаммаглобулинемия I типа;
• цирроз печени;
• гепатит;
• гипер-IgM-иммунодефицит;
• инфекционный мононуклеоз;
• системные болезни (системный гломерулонефрит, болезнь Крона и пр.);
• макроглобулинемия;
• трипаносомоз;
• грибковые, вирусные и бактериальные инфекции в остром периоде;
• инфекции внутриутробного периода (токсоплазмоз, цитомегаловирус, краснуха и др);
• муковисцидоз;
• моноклональная криоглобулинемия;
• острый лимфолейкоз;
• кандидоз;
• моноклональная гаммапатия невыявленной этиологии;
• хронический лимфолейкоз и др.

Снижение уровня IgM:

• агаммаглобулинемия;
• хронический лимфолейкоз;
• лимфоидная аплазия;
• гепатома;
• болезнь тяжелых цепей;
• дисгаммаглобулинемия II типа;
• IgA- и IgG-миелома;
• СПИД;
• спленэктомия;
• амилоидная дистрофия;
• синдром Вискотта-Олдрича;
• воспаление толстой кишки;
• болезни почек, протекающие с нефротическим синдромом.

На результаты анализа могут повлиять: беременность, физическая нагрузка, лучевая терапия, патологические состояния, приводящие к потере белка (нефротический синдром при гломерулонефрите, болезнь Крона, язвенный колит ), ожоговая болезнь, прием антидепрессантов, нейролептиков, метилпреднизолона, декстрана, пеницилламина, вальпроевой кислоты, химиопрепаратов, препаратов золота, эстрогенов и оральных контрацептивов, а также недавняя иммунизация.

Иммуноглобулины G

Вещества, вырабатывающиеся В-лимфоцитами в ответ на внедрение чужеродных агентов. Обеспечивают длительную защиту организма, предотвращая повторное инфицирование, поскольку обладают свойством «памяти». IgG также усиливают фагоцитоз и принимают участие в активации системы комплемента. Размер частиц позволяет им преодолеть плацентарный барьер, обеспечивая защиту новорожденного в течение первых нескольких месяцев жизни. Составляют около 70-80% от всех иммуноглобулинов крови. Синтез IgG при встрече с антигеном начинается спустя около 5 дней после появления IgM. IgG представлен подклассами G1-G4, снижение которых приводит к рецидивированию инфекции, но может остаться незамеченным при нахождении значений общего IgG в пределах нормы.

Нормы IgG:

Возраст	Пол	Содержание в г/л
до 1 мес.	м	3,98-17,68
	ж	3,95-17,39
до 12 мес.	м	2,07-9,51
	ж	2,05-9,37
до 2 лет	м	4,77-9,23
	ж	4,85-9,28
до 80 лет	м	5,48-16,26
	ж	5,56-16,43

Заболевания, связанные с изменением содержания в крови IgG

Повышение уровня IgG:

• болезни печени (гепатит, алкогольная болезнь печени, цирроз);
• заболевания органов дыхания, урогенитального тракта и кишечника инфекционной природы как в остром, так и в хроническом периоде;
• выздоровление после первичного инфицирования;
• повторная инфекция в остром периоде;
• инфекционный мононуклеоз;
• системные болезни (неспецифический язвенный колит, аутоиммунный тиреоидит и пр.);
• саркоидоз;
• IgG-миелома;
• болезнь Вальденстрема;
• лимфомы;
• множественный склероз;
• муковисцидоз;
• СПИД;
• нейросифилис;
• моноклональная гаммапатия неизвестной этиологии;
• хронический лимфолейкоз и др.

Снижение уровня IgG:

• агаммаглобулинемия;
• гипогаммаглобулинемия;
• хронический лимфолейкоз;
• вирусные инфекции с хроническим течением;
• гипер-IgM-синдром;
• лейкоз;
• болезнь тяжелых цепей;
• дисгаммаглобулинемия I типа;
• IgA-миелома;
• аллергические заболевания;
• синдром Вискотта-Олдрича;
• ВИЧ-инфекция;
• недостаточность цианокобаламина (витамина В12);
• атаксия-телеангиэктазия;
• недостаток подклассов IgG;
• спленэктомия;
• заболевания почек с нефротическим синдромом;
• воспаление толстой кишки.

Обследование проводится до начала лечения либо спустя 14 дней после его завершения.

Иммуноглобулины Е

Способны присоединяться к базофилам и тучным клеткам слизистых оболочек с их последующей дегрануляцией, высвобождением биологически активных веществ и развитием реакции гиперчувствительности. Участвуют в формировании иммунитета к глистным инвазиям и в развитии аллергических реакций.

[youtube]T7v9FZgZiDg[/youtube]

Нормы IgE:

Возраст	Содержание, МЕ/мл
Новорожденные	до 1,5
Меньше 12 месяцев	до 15
12 месяцев — 6 лет	до 60
от 6 до 9 лет	0 — 90
от 9 до 16 лет	до 200
Старше 16 лет	до 100

Заболевания, связанные с изменением показателей IgE в сыворотке крови

Повышение IgE:

• аллергические заболевания;
• аллергический бронхолегочный аспергиллез;
• узелковый периартериит;
• IgE-миелома;
• синдром Иова;
• синдром Ди-Джоржи;
• аплазия тимуса;
• реакции отторжения трансплантата;
• глистные инвазии.

[youtube]Wt1jZFiYK4c[/youtube]

Снижение уровня IgE:

• агаммаглобулинемия;
• гипогаммаглобулинемия;
• синдром Луи-Бар;
• иммунодефицитные состояния.

Решение о необходимости коррекции иммунитета может быть принято на основании результатов иммунограммы при условии, что имеют место стойкие изменения как численности, так и качественных параметров структур, осуществляющих защиту организма, соответствующие клиническим проявлениям заболевания и сопровождающиеся значительным отклонением от пограничного значения возрастной нормы.